抗菌肽Dermadistinctin基因家族串联体的构建及其抗菌活性鉴定

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhiqi_xu
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本文根据GenBank中的Dermadistinctin K(DDK),Dermadistinctin L(DDL)的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏好密码子,采用SOE法合成了抗菌肽DDK,DDL基因。在DDK,DDL中引入肠激酶裂解位点,并将其依次克隆入PET32a质粒,构建串联体融合表达载体p-DDKL,并转入Rosetta(DE3)中进行融合表达。在加入IPTG终浓度0.1mM诱导4h可达到最大表达量。命名为DDKL的重组蛋白表达产物经镍离子亲和层析柱纯化以及肠激酶裂解之后,对其进行抑菌活性分析。结果证实抗菌肽DDKL对金黄色葡萄球菌(Cowan Ⅰ)、E.coli DH5α、致病性E.coliO(1)为代表的革兰氏阳性菌和阴性菌均显示出一定的抑菌活性。
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