【摘 要】
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许多间质性肺疾病表现为胸膜及胸膜下纤维化.近年的研究进展提示,作为一种特殊的上皮细胞,胸膜间皮细胞可能在肺纤维的发生中起作用.为深入研究胸膜间皮细胞参与肺纤维化的机制,本文拟探讨胸膜间皮细胞在博来霉素作用下是否发生上皮-间充质转换(Epithelia-mesenchymal transition,EMT)、是否参与肺纤维化的形成.采用购买于ATCC的胸膜间皮细胞系细胞,培养条件下以博来霉素刺激,检
【机 构】
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华中科技大学同济医学院病理生理系;卫生部呼吸系疾病重点实验室,湖北省,武汉市,430030 华中科
【出 处】
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中华医学会第七次全国高原医学学术会议暨中国病理生理学会第九次全国缺氧和呼吸病理生理学术会议
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许多间质性肺疾病表现为胸膜及胸膜下纤维化.近年的研究进展提示,作为一种特殊的上皮细胞,胸膜间皮细胞可能在肺纤维的发生中起作用.为深入研究胸膜间皮细胞参与肺纤维化的机制,本文拟探讨胸膜间皮细胞在博来霉素作用下是否发生上皮-间充质转换(Epithelia-mesenchymal transition,EMT)、是否参与肺纤维化的形成.采用购买于ATCC的胸膜间皮细胞系细胞,培养条件下以博来霉素刺激,检测细胞增殖、观察细胞形态的变化,采用Western blot检测细胞内Ⅰ型胶原、上皮细胞标志物(E-Cadherin、CK-8)、间充质细胞标志物(Vimentin、α-SMA)的变化,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,从而判断胸膜间皮细胞是否发生EMT.整体实验方面,采用多次腹腔注射博来霉素的方法复制小鼠肺纤维化模型,肺组织切片行Masson染色观察纤维化的形成、间皮细胞特异性标志物Calretinin荧光染色观察胸膜间皮细胞向肺内的移行情况及与纤维化病灶的关系,判断胸膜间皮细胞在纤维化中的作用.
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