【摘 要】
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目的构建一种可同时检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2亚型流感病毒的多重Real-time PCR方法。方法根据不同流感亚型HA与NA的差异,设计五对引物及五种探针,构建合适的检测体系,
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目的构建一种可同时检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2亚型流感病毒的多重Real-time PCR方法。方法根据不同流感亚型HA与NA的差异,设计五对引物及五种探针,构建合适的检测体系,分析特异性、灵敏度、可重复性、仪器适用性,并将其与常用检测试剂盒进行比对。结果本研究成功构建了多重Real-time PCR检测体系,能同时检出甲型H1N1、季节性H1N1及H3N2亚型流感病毒,检测灵敏度为101~102拷贝/μL,可重复性好(变异系数为0.47%~4.03%),比常用检测试剂具有更好的荧光值水平,可适用于多种常见的荧光定量PCR仪。结论本方法所构建体系具有较好的特异性、灵敏度、可重复性、仪器适用性,节约试剂、人力和时间成本,适合基层疾控及其他医疗单位进行流感亚型应急检测。
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