论文部分内容阅读
斑马鱼作为一种相对新颖的模式脊椎动物，在生命科学诸多研究领域中已显示出其独特的优势和广阔的前景。然而，与成熟的基因敲除技术相比，定向基因敲入技术在斑马鱼中还没有建立完善，这也成为了斑马鱼相关研究的技术瓶颈。虽然最近有报道尝试在斑马鱼上进行外源蛋白的定向敲入，但都造成了被靶向的内源基因的破坏，限制了其在斑马鱼领域的应用。为了解决这个问题，我们建立了新的基因敲入技术，在内含子中进行Cas9定点操作，同时结合非同源重组的高效整合效率和同源重组的供体质粒的设计，实现了高效特异的外源基因的定点敲入。