STAT5A基因有效siRNA序列的筛选及其对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

来源 :第7届全国疑难及重症肝病大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiaolang
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目的:筛选针对STAT5A基因的有效的siRNA,研究抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨STAT5A基因在肝癌发生发展中的作用.方法:设计并化学合成针对STAT5A基因三个靶点的siRNA,采用脂质体法转染肝癌细胞HepG2,分别用半定量RT-PCR、western blot技术检测转染后HepG2细胞STAT5AmRNA和蛋白表达的变化,从中筛选出一段干扰效率最显著的siRNA;用该siRNA转染HepG2细胞,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测凋亡率.结果:3段STAT5A基因的siRNA对HepG2细胞中STAT5A mRNA和蛋白表达均有不同程度的抑制作用,其中以siRNA-3697的干扰效率最高,STAT5A mRNA和蛋白的表达抑制率分别为72.03%, 66.27 % (P<0.05);并能使细胞生长速度减慢、增殖显著抑制,细胞凋亡率为33%(P<0.05)。结论:成功筛选出针对STATSA基因的有效的siRNA;该siRNA可特异地阻断HepG2细胞STAT5A基因的表达,抑制细胞生长,诱导细胞凋亡。
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本文拟探讨在同一个实验体系中,采用不同的标化策略,观察多个研究靶基因在肝癌患者中的表达变化差异,评价不同参考基因及标化策略不同对循环miRNA水平检测结果的影响程度.结果表明:采用不同的标化策略会影响血浆循环miRNA的定量结果,使得不同实验室报道的实验数据出现不一致甚至矛盾。制定规范化的检测指南,统一内参基因的选择和标化策略可能是进一步研究特定miRNA是否可以作为生物标志的首要任务。血浆miR
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目的:探讨博路定治疗慢性乙型肝炎患者过程中血清巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、白细胞介素(IL-17)及白细胞介素10(IL-10)的含量,并探讨其临床意义.方法:选择36例慢性乙型肝炎患者作为实验组,选择20例健康查体者作为对照组,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定两组血清中MIF、IL-17和IL-10的含量.实验组应用博路定,在治疗的不同时间点抽取实验组及健康对照者静脉血,分离血清,检测血
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