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目的 建立慢病毒载体稳定转染大鼠骨髓间质干细胞的方法并研究转染后细胞性质.方法 采用基于HIV-1的VSV-G假膜化的慢病毒载体转染大鼠骨髓来源的间质干细胞;研究不同转染条件包括感染复数、感染方式、感染次数对转染效率的影响;通过流式细胞仪检测转染后大鼠骨髓间质干的绿色荧光蛋白表达情况;通过PCR和RT-PCR检测慢病毒基因整合至大鼠间质干细胞基因组情况;有限稀释法克隆单个慢病毒转染阳性大鼠间质干细胞,体外研究其生长动力学,细胞周期,细胞核型和分化能力,体内研究其向缺血再灌注大鼠肾损伤部位迁徙情况.结果 利用慢病毒高效感染大鼠骨髓间质干细胞,转染效率达95%以上.转染效率和荧光强度随感染复数增加而升高;离心力作用下感染效率为静态作用下的两倍以上;在感染复数为12.5时连续感染两轮后转染效率从39.1±2.7%升高至62.4±1.7%,两轮以后转染效率无显著升高.PCR证实慢病毒基因稳定整合至大鼠间质干细胞基因组中.有限稀释获得四株单个转染阳性细胞来源的大鼠间质干细胞克隆.流式分析表明转染的大鼠间质干细胞克隆培养16周后依然维持与亲代转染后一周水平相近的阳性率.生物学特性分析表明慢病毒转染未影响大鼠间质干细胞的生长和遗传稳定性,不改变其体外成骨成脂分化能力和体内向损伤位点迁徙能力.结论 本研究采用优化的慢病毒转染条件明显提高了大鼠间质干细胞转染效率和存活率,并且不影响其生物学特性,为利用间质干细胞基因和细胞治疗大鼠疾病模型奠定了基础.