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以芘（Py）为荧光探针、二苯甲酮为猝灭剂,利用荧光探针法研究span-80在环己烷中的聚集行为随其浓度的变化规律。随着span-80浓度的增加,芘的I1/I3的变化曲线存在两个突变点,第一突变点(0.7×10-3mol/L)为span-80分子铺满溶液表面时的溶液浓度,第二突变点（0.035mol/L）对应span-80的临界胶束浓度。随着span-80浓度的增加,span-80在环己烷中的聚集行为可区别为三个阶段:胶束浓度增加阶段、胶束聚集数线性增加阶段和胶束形态复杂化阶段。跨越胶束浓度增加阶段将胶束聚集数线性增加阶段外推至临界胶束浓度处以求取临界胶束浓度并不合理。