MRSA诱导大鼠内植物相关感染模型评估纯镁金属内植物的抗感染性能

来源 :中华医学会第十七届骨科学术会议暨第十届COA国际学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuzhic
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  目的:以治疗和预防骨科内植物感染为主要临床应用方向,研制可降解镁基金属内植物材料,通过对其抗菌行为和骨诱导行为的深入研究,实现对镁基金属抗感染性能的系统评估;通过建立SD大鼠股骨骨髓炎模型对纯镁金属内植物的抗感染作用和骨修复作用进行系统研究,提出镁基金属的抗感染作用机制.为实现医用镁基金属的临床转化提供科学依据.方法:①纯镁金属样品对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抗菌性能:将纯镁金属和对照材料钛片(Ti)与标准菌株ATCC43300(MRSA,耐甲氧西林葡萄球菌)悬液共培养.采用结晶紫染色定量比较材料表面的细菌生物膜形成情况.使用LIVE/DEAD细菌活性检测试剂盒对材料表面黏附的细菌进行染色观察,比较不同材料表面细菌黏附和生物膜的形成情况.采用TSA涂板梯度稀释法计数材料表面单克隆菌落的数量,进行抑菌效率的测定.②纯镁金属样品对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抗菌机制研究:采用RT-PCR检测生物膜形成相关的黏附多糖调控基因icaA以及ph值相关基因agrRNAⅢ的表达,探讨碱性微环境对细菌生物膜形成的影响机制.③纯镁金属髓内针预防SD大鼠股骨内植物相关感染的体内研究:将纯镁金属髓内针和致病菌共培养后植入SD大鼠股骨骨髓腔,建立內植物周围感染微环境.进行感染一般指标观察,包括体温,体重,局部渗出物,拍摄X片和ECT扫描.定期取材进行微生物学分析,解剖手术侧股骨观察感染征象,取材在扫描电子显微镜下观察;将每组取材股骨称重后液氮研磨,将研磨后的骨粉离心稀释后进行TSA琼脂平板计数,测定抑菌效率,每组各取一块有菌落生长的琼脂平板进行菌种鉴定.结果:纯镁金属内植物降解所产生的碱性微环境可对耐甲氧西林葡萄球菌(MRSA)产生较强的抑制和杀灭作用,并可显著下调生物膜形成相关的黏附多糖调控基因icaA以及ph值相关基因agrRNAⅢ的表达,在体内实验中纯镁金属内植物可有效预防和治疗内植物相关感染的发生和发展.结论:利用镁基金属在体内降解产生碱性微环境起到的抗感染功能和成骨诱导活性,可有效治疗和预防骨髓炎,同时降低骨科内植物相关感染的发生率.有望成为一种防治内植物相关感染,骨髓炎等骨组织感染相关疾病的新方法.
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