【摘 要】
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建立测定小鼠全脑组织Glu和GABA浓度测定的反相高效液相色谱(RP-HPLC)方法.冰上剥离小鼠全脑组织,低温匀浆处理,离心制备匀浆液.以2、4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂.色谱条
【机 构】
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云南中医学院医化与生化教研室云南中医学院实验中心云南中医学院医学生物学与统计学教研室昆明650500
【出 处】
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2016全国中医药生物化学与分子生物学年会
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建立测定小鼠全脑组织Glu和GABA浓度测定的反相高效液相色谱(RP-HPLC)方法.冰上剥离小鼠全脑组织,低温匀浆处理,离心制备匀浆液.以2、4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂.色谱条件为Diamonsil C18色谱柱乙腈和醋酸钠缓冲液为流动相,采用二元梯度洗脱,UV350检测,峰面积定量.二氨基酸在18分钟内分离完全.在0.50-100ug/ml范围内线性关系良好.测定小鼠脑组织液与乙腈、碳酸氢钠和DNFB的最佳比例为2∶2∶2∶1.小鼠脑组织用甲醇/水(V/V=1∶1)稀释的最佳比例为1∶6.银杏胚芽制备物灌胃致毒小鼠脑组织中Glu和GABA均较正常组出现明显下降,初步证明银杏中毒与Glu/GABA神经递质的变化有关.
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