【摘 要】
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针对楸树(CatalpabungeiC.A.Mey)新品系定向无性繁育技术瓶颈的问题,以楸树优良家系、无性系为材料,建立高频率发生的、稳定保存的体细胞胚胎发生体系.楸树60天果龄的幼嫩种胚为最适外植体,优选幼嫩种胚愈伤组织诱导最适培养基为1/2MS+2,4-D1.0mg·L-1+6-BA0.1mg·L-1,诱导率可达90％;胚性愈伤组织诱导最适培养基为1/2MS+6-BA0.2mg·L-1+NAA
【机 构】
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中国林业科学研究院林业研究所林木遗传育种国家重点实验室国家林业局森林培育重点实验室 北京100091
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针对楸树(CatalpabungeiC.A.Mey)新品系定向无性繁育技术瓶颈的问题,以楸树优良家系、无性系为材料,建立高频率发生的、稳定保存的体细胞胚胎发生体系.楸树60天果龄的幼嫩种胚为最适外植体,优选幼嫩种胚愈伤组织诱导最适培养基为1/2MS+2,4-D1.0mg·L-1+6-BA0.1mg·L-1,诱导率可达90％;胚性愈伤组织诱导最适培养基为1/2MS+6-BA0.2mg·L-1+NAA0.05mg·L-1,体胚诱导率可达59.82％;胚性愈伤组织及体胚在pH值为6.0、添加0.80％琼脂粉的培养基中增殖生长良好.在此基础上开展体胚萌发再生正常植株的高频发生和驯化移栽高成活率的技术体系研究,成熟子叶胚在1/2MS基本培养基中能够萌发成苗,获得完整植株,当高度达到5-8cm时,选择根系健壮的幼苗进行炼苗和移栽,成活率可达85％.通过转录组测序分析开展楸树体胚发生的分子机制研究.测序数据组装后获得73,038个Unigene,比对到七大功能数据库进行注释,共检测出51,789个CDS,未注释上的Unigene使用ESTScan预测后获得1,189个CDS.差异表达基因检测表明,对比胚性愈伤组织,有5,316个差异表达基因在胚性愈伤组织中下调表达,6,994个差异表达基因在楸树胚性愈伤组织中上调表达.通过对差异表达基因的GO功能富集和KEGG通路聚类分析表差异表达基因的生物过程和分子功能、生物通路等,表明这些基因在楸树胚性愈伤组织诱导和体胚分化中起重要调节作用.
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