【摘 要】
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[目的]研究吡唑啉酮衍生物Cu-PMPP-SAL 对HeLa 细胞MAPK 和NF-κB 信号通路的影响.[方法]MTT 法检测Cu-PMPP-SAL 对HeLa 细胞的作用,通过Hoechst 33258 染色法及透射电子
【机 构】
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新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐830046新疆大学应用化学研究所
【出 处】
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新疆动物学会2016年学术研讨会暨第七届青年学术论坛
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[目的]研究吡唑啉酮衍生物Cu-PMPP-SAL 对HeLa 细胞MAPK 和NF-κB 信号通路的影响.[方法]MTT 法检测Cu-PMPP-SAL 对HeLa 细胞的作用,通过Hoechst 33258 染色法及透射电子显微镜观察细胞变化,LDH 活性检测细胞的LDH 释放率,碘化丙锭单染色检测HeLa 细胞周期,Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术检测HeLa 细胞变化；通过MTT 法检测Cu-PMPP-SAL 对TNF-α刺激后的HeLa 细胞的生长,Western Blot 法研究化合物对HeLa 细胞MAPK 和NF-κB 信号通路的影响.[结果]MTT 法检测发现Cu-PMPP-SA 作用HeLa 细胞72 h 后,化合物Cu-PMPP-SAL 具有很好的抗肿瘤活性,IC50 值为：2.082 μg/mL；Cu-PMPP-SAL 处理HeLa 细胞后产生了凋亡小体,LDH 活性检测显示细胞的LDH 释放率上升,Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术检测发现HeLa 细胞产生了显著的凋亡变化(P<0.05)；Cu-PMPP-SAL 显著降低细胞内线粒体膜电位水平(P<0.05),并且能够激活caspase-3 和-9 的活性.通过MTT 法检测发现Cu-PMPP-SAL 对TNF-α 刺激后的HeLa细胞的生长具有抑制作用； Western Blot 检测结果证实了Cu-PMPP-SAL 能够抑制HeLa 细胞NF-κB信号通路上游的IκBα 的磷酸化；Cu-PMPP-SAL 可能通过抑制Iκ-Bα 的磷酸化进而抑制MAPK 和NF-κB 信号通路的激活,从而导致细胞死亡.[结论]Cu-PMPP-SAL 能通过caspase 依赖的线粒体凋亡途径诱导HeLa 细胞凋亡,并且还能通过抑制HeLa 细胞内Iκ-Bα 的磷酸化进而影响MAPK 和NF-κB 信号通路.
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