阿维菌素是由阿维链霉菌(streptomyces avermitilis)产生的一类16元环大环内酯类抗生素.最初由日本学者大村智和美国默克公司研究组在日本静冈土壤中发现并分离,经鉴定发现其为一个新种,并且其发酵液对动物寄生虫及多种农业害虫有极强的杀灭效果.它由8个组分(Ala、A2a、Bla、B2a、A1b、A2b、B1b和B2b)组成,其中尤以B1a的驱虫活性最强. 本文先对出发菌株A3进行复壮，得到编号为A19的菌株，其Bla的产量为3050ug/ml。然后用二乙烯亚胺对A19进行诱变处理，并结合链霉素抗性筛选，获得到Bla突变株A453其阿维菌素Bla的产量为4190ug/ml，较A19提高37.3％。再对A453菌株原生质体二乙烯亚胺诱变，再生菌株中筛选到Bla突变株A1102，其Bla产量为4509ug/ml，较A453提高7.6% o.选取原生质体诱变筛选所得到的优良菌株A1102,A1116,A1124,A1142,A1119和A1022作为基因组改组亲本，分别用紫外照射5min，0.3%乙烯亚胺作用15分钟，50℃热灭活5min等方法灭活，将不同方法灭活的6种亲本原生质体等比例混合，40%的PEG6000静置处理15min，诱导多亲本间原生质体融合和基因组改组，将融合子涂布含阿维菌素Bla的平板上，筛选抗反馈抑制的菌株。 利用基因工程的方法，将高产菌株的基因组DNA上的阿维菌素合成基因簇进行了改造。将该基因簇中的aveD基因通过同源重组进行敲除，导致产物中的A组分消失，筛选突变菌株结果得到的aveD敲除菌株较出发菌株提高约10%。同时由于阿维菌素的聚酮合成酶aveA1基因中第二个module的DH为部分活性，即部分催化碳23位上的羟基脱水反应。而下游的合成酶各个domain不能区分此位置上的脱水发生与否，就直接进行下游反应，因此，在产物中组分1和组分2相当。通过基因同源重组的方法，将已经证实的具有完整功能的红霉素DH替换原始的DH结构，实现DH的完全脱水功能，从而减少或完全消除羟基组分。