【摘 要】
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目的：利用果蝇S2细胞表达IBDV VP2融合蛋白,并对其抗体结合能力进行鉴定.方法：通过设计特异性引物扩增IBDV VP2蛋白的编码基因,与昆虫表达载体pMT/BiP/V5/HisA连接构建重组表达载体pMT/BiP/V5/HisA-VP2.将重组表达载体与筛选质粒粒pCoBlast共转染果蝇S2细胞后表达VP2融合蛋白,然后纯化目的蛋白,并对表达产物进行鉴定.结果：Western-blotti
【机 构】
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北京农学院,北京102206 北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京100097
【出 处】
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第三届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨“瑞普杯”新思想、新方法、新观点论坛
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目的：利用果蝇S2细胞表达IBDV VP2融合蛋白,并对其抗体结合能力进行鉴定.方法：通过设计特异性引物扩增IBDV VP2蛋白的编码基因,与昆虫表达载体pMT/BiP/V5/HisA连接构建重组表达载体pMT/BiP/V5/HisA-VP2.将重组表达载体与筛选质粒粒pCoBlast共转染果蝇S2细胞后表达VP2融合蛋白,然后纯化目的蛋白,并对表达产物进行鉴定.结果：Western-blotting分析表明,融合蛋白相对分子质量为46kDa,该融合蛋白具有与His标签抗体良好的结合能力.结论：IBDV的VP2融合蛋白能在S2果蝇细胞中进行表达,并且能分泌到上清中。经鉴定,表达产物具有良好的抗体结合能力,可用于抗体检测.
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