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目的:本实验通过纤维环穿刺法建立兔腰椎椎间盘退变模型,观察椎间盘退变过程中P14、P53的表达变化情况与椎间盘细胞衰老、细胞凋亡情况及椎间盘退变程度相关性,初步探讨P14、P53与椎间盘退变的关系.方法:将40只新西兰大白兔随机分为2组.A组为实验组(纤维环穿刺组,20只),B组为对照组(假手术,20只).于术后2、4、8、16周各时间段两组均随机抽取5只行MRI检查.于术后2、4、8、16周各时间段两组各处死5只兔子取椎间盘髓核组织做如下检查:1,中性甲醛固定,石蜡包埋,切片,行HE染色检查.2,用Safranin O染色观察髓核蛋白多糖的改变.3,用免疫组化的方法检测椎间盘组织P53、P14表达情况和Ⅰ型胶原和Ⅱ胶原的含量.4,TUNEL染色检测两组的细胞凋亡情况.结果:1,MRI提示:实验组T2W I像椎间盘信号自术后开始降低,且随着术后时间延长T2WI像椎间盘信号降低越明显,于术后4周较对照组有明显改变,术后16周最明显.对照组术后改变不明显.2,HE染色显示实验组术后软骨样细胞减少、凋亡增多,纤维样细胞所占比例增大,胞外纤维排列紊乱,于第4周较对照组有明显改变,于第16周最明显.3,Safranin O染色;组织着色与术后开始变浅,随着术后时间延长PG含量降低越明显,于术后4周较对照组有明显改变,术后16周最明显.Safranin O染色在实验组术后2、4、8、16周的图像灰度值:实验组:49351±4251、38754±3239、25637±2193、14321±1230;对照组:48363±2587、43 190、±1675、 41252±5476、 39878±2015.术后2周表达实验组与对照组无统计学差别,术后4、6、8周有明显实验组与对照组有明显的统计学差别.4,免疫组化显示:P53在实验组术后2、4、8、16周细胞的表达阳性率为:46.12%±3.24%、53.51%±2.34%、69.45%±4.31%、80.64%±5.72%;对照组为:31.89%±3.74%、33.45%±5.31%、33.96%±4.27%、38.95%±2.01%.P53表达术后2、4、8、10周有明显实验组与对照组有明显的统计学差别.P14在实验组术后2、4、8、16周细胞的表达阳性率为:60.17%±7.49%、76.34%±3.58%、84.43%±1.80%、97.18%±0.84%,对照组术后2、4、8、16周的表达阳性率为:47.39%±3.87%、48.58%±2.07%、49.71%±4.18%、50.73%±9.26%.P14术后2、4、6、8周有明显实验组与对照组有明显的统计学差别.4.3,Ⅰ型胶原在实验组术后2、4、8、16周的免疫组化图像灰度:实验组:138.94±8.65 122.60±3.10 115.81±5.73 101.84±2.05;对照组:138.59±2.08 135.09±1.67 132.21±5.76 130.50±2.15.术后2周表达实验组与对照组无统计学差别,术后4、6、8周有明显实验组与对照组有明显的统计学差别.4.4,Ⅱ型胶原在实验组术后2、4、8、16周的免疫组化图像灰度:实验组:113.27±4.31 125.31±8.03 136.85±1.07 142.12±2.67;对照组:114.51±3.10 117.09±2.19 117.87±3.93 120.10±2.18.术后2周表达实验组与对照组无统计学差别,术后4、6、8周有明显实验组与对照组有明显的统计学差别.5,TUNEL染色:对照组术后2、4、8、16周细胞凋亡的阳性率:8.43±2.12,9.13±1.47,10.25±2.25,14.83±0.13;实验组:14.31±1.03,20.32±1.07,26.51±2.81 29.35±1.10.术后2、4、6、8周有明显实验组与对照组有明显的统计学差别.结论:纤维环穿刺法建立兔腰椎椎间盘退变模型是一种可靠的椎间盘退变造模方法;P53、P14在椎间盘退变组中的高表达提示:P53、P14通过诱导椎间盘细胞的衰老在椎间盘退变过程有重要的作用.