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超声波协同固定化脂肪酶催化制备生物柴油的最佳工艺条件为:超声波功率70W、叔丁醇为反应介质、叔丁醇用量3%(v/v)、醇油比3:1且甲醇分三批加入、反应温度40℃、水含量为2%(v/v)。副产物甘油对固定化脂肪酶使用寿命影响最大,使用后的固定化脂肪酶用丙酮洗去表面的甘油,进行酯交换反应,酶的稳定性大为提高,可连续使用16批次。