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目的:鉴定肝细胞中雌激素受体α(ESR1)基因启动子使用情况。
方法:常规培养和刺激细胞,甲醛固定细胞,超声剪切染色质,采用利用PolⅡCTD末端Ser5特异性抗体进行染色质免疫沉淀(PolⅡ-ChIP),针对文献报道的8个可能启动子区设计引物进行PCR扩增,鉴定ESR1基因启动子的使用情况。
结果:β-雌二醇刺激不同肝细胞后进行PolⅡ-ChIP发现,HepG2肝癌细胞株中ESR1启动子E1、E2、F沉淀出有PolⅡ的结合的片段,而在LO2细胞株中则仅启动子D有PolⅡ的结合的片段沉淀出来。
结论:不同肝细胞中ESRl的表达受不同的启动子的调控。HepC2肝癌细胞株中ESR1的表达受启动子E1、E2、F调控,而在LO2细胞株中EsRl的表达受启动子D调控。