中华绒螯蟹锰超氧化物歧化酶基因克隆及其对饲料锰水平的响应

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为获知中华绒螯蟹锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因序列及其对饲料中锰水平响应情况,本研究采用cDNA快速末端扩增技术获得了中华绒螯蟹Mn-SOD cDNA全序列,通过实时定量PCR研究了Mn-SOD在中华绒螯蟹不同组织中的表达水平,此外,在基础饲料中添加不同水平硫酸锰(0,20,40,80,160和240mg/kg),养殖6周后,实时定量PCR和酶活性分析中华绒绒螯蟹幼蟹肝胰腺组织中Mn-SOD mRNA的表达量和酶活性。结果显示,该基因cDNA全长为1,339 bp,包括20 bp 5’-UTR,867 bp ORF和452 bp 3’-UTR,共编码288个氨基酸,其编码蛋白的分子量为31.43 kDa,理论等电点为6.30。Mn-SOD基因在各组织均有表达,其中在肝胰腺中表达量最高,而其他组织中表达量相对较低。与未添加锰组饲料和高含量锰饲料组相比,中华绒螯蟹Mn-SOD基因表达丰度和酶活性在摄取20-40 mg/kg饲料时显著升高(P<0.05)。研究表明,饲料中适宜微量元素锰含量能够显著促进含锰超氧化物歧化酶mRNA的表达量进而提高酶活性。
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