目的:使用自体细胞构建的组织工程皮肤是快速有效修复各类皮肤缺损的重要方法,而足够数量的种子细胞是成功构建组织工程皮肤的关键.尝试使用Cytodex-3微载体和高截面纵横比的旋转式生物反应器(RCCS)容器作为培养系统,大规模扩增人皮肤成纤维细胞. 方法:利用组织贴壁法从人皮肤中分离出人真皮成纤维细胞(hDFBs)进行体外培养,使用DIO标记细胞后结合微载体在旋转式生物反应器中培养,细胞贴附微载体的状况使用荧光显微镜、扫描电镜观测.并且检测细胞周期和分析细胞群体倍增时间来比较微重力培养与平面培养的体外增殖能力差异. 结果:在旋转式生物反应器的微重力培养体系中，人成纤维细胞能快速贴附到微载体表面，在培养过程中达到很大的细胞密度，并且表现出很强的增殖能力和细胞活性。 结论:利用旋转式生物反应器和微载体悬浮培养人皮肤成纤维细胞，是大量制备皮肤组织上程种子细胞的一种有效方法。