【摘 要】
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(目的)本文通过建立池塘型水体有机胂暴露胁迫模型,研究鲫鱼在洛克沙胂暴露胁迫下肝脏蛋白的差异性表达,旨在为有机胂添加剂所致的养殖场周边水环境砷污染引起的生态毒性
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,国家兽药安全评价(环境评估)实验室(华南农大),广州,510642
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨
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(目的)本文通过建立池塘型水体有机胂暴露胁迫模型,研究鲫鱼在洛克沙胂暴露胁迫下肝脏蛋白的差异性表达,旨在为有机胂添加剂所致的养殖场周边水环境砷污染引起的生态毒性和早期的分子诊断提供科学依据.(方法)选取6~8cm鲫鱼为实验动物,在室内水池模拟环境中(水温21±2℃、pH6.5±0.5、溶解氧D.O7.5~8.5mg/L)设洛克沙胂组(150μgAs/L)和空白组,分别于7、14、21天采样.采用双向凝胶电泳技术优化分离鲫鱼肝脏蛋白,并对其中匹配良好的显著性差异点采用基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱技术(MALDI-TOF/MS)进行检测,由数据库检索鉴定与分析其差异蛋白分类及特性.(结果)结果表明:(1)在洛克沙胂的暴露胁迫下,鲫鱼肝脏产生的差异蛋白共有101种(P<0.05),其中有74种蛋白表达上调,27种表达下调,在暴露胁迫的中期(14天),蛋白的变化种类最多,有49种,其中29种发生了上调变化,20种发生了下调变化;在暴露胁迫的后期(21天),有20种蛋白发生变化,全部为上调.(2)经选取36个匹配良好的显著性差异点进行鉴定,在这36种蛋白中,有27种蛋白属于鲤科,与鲫鱼属同一科,占75%.(3)依据蛋白质的GO注释和在相关文献中报道的所参与的生物过程和分子功能,将鉴定得到的鲫鱼肝脏蛋白分为8类,包括碳水化合物代谢相关蛋白(10个点,占28%),细胞骨架蛋白(6个点,占17%),能量代谢相关蛋白(3个点,占8%),信号转导相关蛋白(5个点,占14%),氨基酸代谢相关蛋白(4个点,占11%),分子伴侣蛋白(5个点,占14%),氧化应激相关蛋白(2个点,占5%),未分组蛋白(1个点,占3%).(结论)本文从蛋白水平初步探讨了洛克沙胂对水生生物鲫鱼的分子生态毒性效应,获得与其暴露胁迫密切相关的肝脏差异蛋白,为有机胂添加剂暴露胁迫下对水环境的分子生态毒理学研究及其早期预警分子标志物的筛选提供依据.
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