【摘 要】
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目的：应用无血清培养基分离胰腺癌干细胞，检测其miR-590-3p的表达。方法：运用无血清培养基克隆培养ASPC-1，PANC-1细胞，检测其单克隆形成、自我更新及分化、细胞周期、耐药和表面标记物CD24/CD44表达等，验证其肿瘤干细胞特性。qRT-PCR检测miR-590-3p在胰腺癌干细胞中的表达。结果：0.94±0.53％和0.57±0.12％的ASPC-1和PANC-1细胞在无血清培养基
【机 构】
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430030 武汉，华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科
【出 处】
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第四届海峡两岸一般外科学术研讨会暨中国临床普外科前沿与争论高峰论坛
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目的：应用无血清培养基分离胰腺癌干细胞，检测其miR-590-3p的表达。
方法：运用无血清培养基克隆培养ASPC-1，PANC-1细胞，检测其单克隆形成、自我更新及分化、细胞周期、耐药和表面标记物CD24/CD44表达等，验证其肿瘤干细胞特性。qRT-PCR检测miR-590-3p在胰腺癌干细胞中的表达。
结果：0.94±0.53％和0.57±0.12％的ASPC-1和PANC-1细胞在无血清培养基中能存活，呈克隆球样悬浮生长，并可以在体外连续传代；加入血清后细胞球贴壁分化。ASPC-1，PANC-1细胞球G0/G1期分别为75.3±5.4％，80.1±4.7％；ASPC-1，PANC-1细胞球CD24+CD44+比例分别为0.38％-0.43％，4.91％-5.21％，高于细胞系中的表达（P<0.05）；细胞球较普通胰腺癌细胞对吉西他滨明显耐药；ASPC-1，PANC-1细胞球miR-590-3p表达分别是细胞系的4.21-5.15，4.18-5.09倍（P<0.05）。
结论：应用无血清培养基可以从ASPC-1，PANC-1细胞系中分离出具有干细胞特性的胰腺癌细胞球，其miR-590-3p表达上调，可能是胰腺癌干细胞特性维持关键基因。
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