油菜含油量QTL的定位及候选基因HD的功能验证

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甘蓝型油菜含油量是受多基因控制的数量性状,涉及到多种遗传控制体系的影响,其遗传规律较为复杂且受环境因素的影响较大,因此目前对于影响含油量基因的分离与应用存在一定困难。本研究针对甘蓝型油菜品系zy036(高含油量亲本)与51070(低含油量亲本)杂交所获得的250个重组白交系,一方面作为作图群体,构建遗传图谱用于含油量QTL的分析,另一方面分析亲本及重组自交系中极端高低含油量材料混样的角果皮及胚珠基因表达,寻找差异表达基因。通过两方面的结合,以期更为快捷的定位含油量相关基因。目前为止已利用JoinMap3.0构建了由19个连锁群组成的分子标记遗传图谱。图谱总长度为1976.7cM,含251个位点(其中有192个SSR标记位点,59个基因标记位点)。平均图距为7.88cM,共得到6个与含油量相关的QTL,单位点遗传贡献率在3.80%~12.11%之间,总贡献率超过45%。其中根据差异表达基因HD序列设计的分子标记与一个含油量贡献率超过12%的QTL位点紧密连锁。为了验证HD基因的过量表达是否可提高种子含油量,分离zy036的HD cDNA序列(1008bp,336AA)并构建35S启动子驱动的表达载体用于拟南芥转化。转基因株系种子含油量初步分析结果表明HD基因不仅可提高种子3-4个点的含油量,同时导致不同程度的早花表型。进一步的验证分析正在进行。
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