【摘 要】
：
SD大鼠品系育种、动物实验已在生物医药领域被广泛应用,但SD大鼠基因敲除模型仍极其缺乏,更无免疫缺陷遗传模型.Lck(Lymphocyte-specific protein tyrosine kinase)基因在胸
【机 构】
：
新乡医学院医学检验学院,新乡453003
【出 处】
：
第十七届中南地区实验动物科技交流会
论文部分内容阅读
SD大鼠品系育种、动物实验已在生物医药领域被广泛应用,但SD大鼠基因敲除模型仍极其缺乏,更无免疫缺陷遗传模型.Lck(Lymphocyte-specific protein tyrosine kinase)基因在胸腺的发育以及T细胞的分化和发育中都起着关键性的作用,所以在SD大鼠中敲除Lck基因,即可以获得T细胞缺失的SD大鼠遗传模型.本研究利用CRISPR/Cas9系统原理,在SD大鼠Lck基因外显子中确定了2个特异性打靶位点,通过体外转录得到sgRNA mRNA和Cas9mRNA,并利用显微注射系统将其注射进入SD大鼠受精卵细胞,最终获得了2只F0代Lck基因敲除SD大鼠,对其进行测序检测,发现其中1号大鼠两条染色体分别缺失280和249个碱基,2号大鼠一条染色体缺失70个碱基.经过回交和杂交,获得了Lck基因敲除纯合子SD大鼠,使用流式细胞术对其外周血进行检测,确认其T细胞已经完全缺失,表明Lck基因敲除SD大鼠遗传模型构建成功.本研冗在SD大鼠中利用CRISPR/Cas9系统敲除Lck基因在国内外尚属首次，具有很高的原创性和非常重要的基础研究和实际应用价值，构建得到的T细胞缺失的并可以稳定遗传的SD大鼠动物模型在免疫相关疾病研究中有着重要的意义。
其他文献
目的:评价注射用DO对SD大鼠生育力与早期胚胎发育毒性的影响.方法:将176只SD大鼠(雌雄各半)随机分为注射用DO高、中、低剂量组和溶媒对照组.雄、雌鼠分别于交配前9周、2周连
目的:观察注射用rhCNB对大鼠妊娠、哺乳及胚胎和仔鼠生长发育及生殖功能的影响.方法:取125只交配成功雌鼠随机分为溶媒对照组、辅料对照组和注射用rhCNB120mg/kg、60mg/kg、2
目的:考察家兔多次耳缘静脉滴注注射用rhCNB后局部血管有无出现扩张、充血、内皮细胞变性、坏死及周围组织水肿、炎细胞浸润等局部刺激反应,判断该供试品的血管刺激性及刺激
目的:研究左旋肉碱对SPF级KM小鼠、SD大鼠记忆力和体重的影响.
方法:将40只小鼠、20只大鼠随机分成空白组、低左组、高左组、对照组,分别给予生理盐水、左旋肉碱(10.8,21
目的:从STZ用法用量、动物情况等因素考察STZ致Ⅰ型糖尿病模型成模情况.
方法:从一次性大剂量注射与多次低剂量腹腔注射STZ、多种剂量腹腔注射STZ、不同日龄鼠注射STZ、
目的:本实验通过比较T2DM猪、非T2DM猪的糖代谢及能量代谢等关键调控基因(PGC-1α、Glut-4、ERRα、NRF-1、TFAM和线粒体基因),探讨这些基因在T2DM发生中所起到的作用.
目的:监控4年内475批次境内市售进入暨南大学实验动物管理中心的实验大、小鼠病原菌、条件致病菌、寄生虫、病毒质量,为控制管理使用环境提供参考.
方法:病原菌、条件致
葡萄糖转运蛋白4(Glut4)介导的葡萄糖转运是肌糖代谢的主要限速步骤.本研究旨在克隆广西巴马小型猪Glut4基因,构建真核表达载体,转染细胞研究Glut4功能.以广西巴马小型猪背最
小鼠作为模式生物,在生命科学和生物医药相关领域的研究中发挥着越来越重要的作用.随着精确的定点遗传操作技术的建立,小鼠已成为解析人类基因功能最重要的模式生物,是研究人
目的:构建大鼠活体胃镜平台,用于大鼠动物模型研究及胃部疾病的临床前研究.方法:用10％水合氯醛,经腹腔注射麻醉SD大鼠,待大鼠完全麻醉后,经口腔导入Olympus输尿管镜URF-V,行胃