【摘 要】
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目的：精子DNA损伤是引起男性不育的常见原因,但其损伤机制尚不完全清楚,本研究探索miRNA在精子DNA损伤中的作用.方法：在对1090名不育患者经病例筛选排除年龄(＞35岁)、环境因素、精液常规异常后,对筛选后的698例进行SCSA检测,并分为精子DNA损伤高组(DFI＞30％,n=94)和精子DNA损伤低组(DFI＜15％,n=380).两组间先选出24例,用real-time PCR的方法,
【机 构】
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华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心 武汉同济生殖医学专科医院
【出 处】
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中华医学会第十届全国计划生育学学术会议
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目的：精子DNA损伤是引起男性不育的常见原因,但其损伤机制尚不完全清楚,本研究探索miRNA在精子DNA损伤中的作用.
方法：在对1090名不育患者经病例筛选排除年龄(＞35岁)、环境因素、精液常规异常后,对筛选后的698例进行SCSA检测,并分为精子DNA损伤高组(DFI＞30％,n=94)和精子DNA损伤低组(DFI＜15％,n=380).两组间先选出24例,用real-time PCR的方法,在精浆中对前期筛选出的18个睾丸特异性miRNAs进行筛查.两组再新选出70例,对于筛选出差异的miRNAs进行验证.对候选的miRNA,检验其在人精浆中的稳定性.将候选的miRNAs包装为慢病毒,显微注射入小鼠睾丸,21天后检测小鼠精子的DNA损伤情况.
结果：在DNA损伤高的患者精浆中，18个睾丸特异性中miR-29c和miR-424含量显著低于DNA损伤低的患者(P＜0.01)，并在后续的验证人群中证实。精浆中的这两个的miRNAs在室温6h内或在4℃24h内都能稳定保存。动物实验显示在睾丸内抑制两个miRNA的表达并不造成小鼠精子密度和前向运动率的减少，抑制miR-322(miR-424小鼠中名称)表达显著增加小鼠精子DNA损伤并引起睾丸内γH2AX的增加，而抑制miR-29c没有引起小鼠精子DNA损伤变化。
结论：实验首次在精浆中筛选出和精子DNA损伤相关的miRNA，并证实小鼠睾丸中miR-424/322的低表达会引起精子DNA损伤。
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