【摘 要】
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为研究马氏珠母贝血清中抗菌肽（AMPs）的提取,本实验采用多步高效液相色谱结合质谱分析,对马氏珠母贝血清中具有抑菌活性的蛋白质开展了分离纯化及鉴定研究,从中获得一种具有抑菌活性的蛋白质成分,并将其命名为马氏珠母贝抗菌肽（PmAMP-1）。我们利用马氏珠母贝基因组和dbEST数据库对质谱测定的部分N-末端序列进行搜索,将匹配的EST序列用作模板以设计用于PCR扩增的特异性引物。通过cDNA末端的快速
【机 构】
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2018年中国水产学会学术年会论文摘要集
【出 处】
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2018年中国水产学会学术年会论文摘要集
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为研究马氏珠母贝血清中抗菌肽（AMPs）的提取,本实验采用多步高效液相色谱结合质谱分析,对马氏珠母贝血清中具有抑菌活性的蛋白质开展了分离纯化及鉴定研究,从中获得一种具有抑菌活性的蛋白质成分,并将其命名为马氏珠母贝抗菌肽（PmAMP-1）。我们利用马氏珠母贝基因组和dbEST数据库对质谱测定的部分N-末端序列进行搜索,将匹配的EST序列用作模板以设计用于PCR扩增的特异性引物。通过cDNA末端的快速扩增（RACE）技术成功克隆了该蛋白质的c DNA序列,其cDNA全长为700bp,开放阅读框为306bp,编码101个AA。通过电镜进一步观察PmAMP-1对细菌的作用机制。定量PCR研究PmAMP-1的组织特异性分布以及细菌诱导后基因丰度变化情况,分析发现在闭壳肌中表达含量最高,血淋巴中含量最低;经细菌刺激之后,8h在血淋巴中表达量最高。本实验为了解马氏珠母贝体液免疫相关因子鉴定了基础,对研究马氏珠母贝的免疫机制蛋白具有重要意义。
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