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为了表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白用于单抗的制备,以含tTTV1全长基因组的重组质粒(pMD18-TTVl-SY13)为模板,用高保真PCR法扩增了PTTV10RF1 (1501~2475)编码的Cap蛋白C末端截短序列(324 aa),引物两端设计了Sal Ⅰ和Not Ⅰ酶切位点,将PCR产物克隆到pGEX-6P-1载体,构建了重组质粒(pGEX-TTVl-ORFl-C1).经序列验证的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta (DE3)菌株进行诱导表达,获得了融合GST的PTTVl-rCap重组蛋白,经SDS-PAGE电泳分析及Westem blot鉴定,目的蛋白获得了高效表达,分子量约64.0kDa,以包涵体形式存在.用纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术获得了8株稳定分泌抗PTTVl-rCap蛋白的杂交瘤细胞株,依次命名为1H4、1E9、1E11、4G12、5C5、7B8、8C2、8G2,单抗亚类鉴定均为IgG1,轻链为K型;单抗培养上清效价为400~3200倍,腹水为4.0×105~6.4×106;其中有7株单抗与PTTVl-rCap蛋白产生特异性反应,另1株单抗(1E11)呈阴性,可能针对构象表位.本研究表达的PTTVl-rCap蛋白和制备的单抗,为进一步建立检测该病毒的诊断方法及抗原表位分析奠定了基础.