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目的:研究漆姑草提取物(HSJ)对人白血病细胞株K562细胞增殖和凋亡的影响,探讨其诱导凋亡的作用机制.
方法:采用不同浓度的HSJ作用K562细胞后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖抑制率;台盼蓝染色法绘制细胞生长曲线;Annexin V-FITC/PI双染法和TdT酶介导的末端缺失原位标记(TUNEL)法检测细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测BCL-2和BAX蛋白的表达;比色法检测caspase 3和caspase9的活性。
结果:HSJ对K562细胞的增殖抑制率随药物剂量增大而增加,作用48h后的IC50为1.35 mg/ml;HSJ作用后细胞生长曲线下移,细胞增殖能力明显下降;HSJ作用后细胞早期凋亡率和晚期凋亡率分别为(8.39±0.81)%、(8.88±1.12)%、(13.42±2.04)%和(26.51 ±3.02)%、(44.08±4.84)%、(54.4±3.73)%,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);K562细胞经HSJ作用后,BCL-2蛋白表达水平下降,BAX蛋白表达水平上升,caspase3和caspase9的活性增强,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05).
结论:HSJ对K562细胞具有增殖抑制作用;HSJ能够诱导K562细胞凋亡;其诱导凋亡作用可能与下调BCL-2蛋白表达水平,上调BAX蛋白表达水平,增强caspase3和caspase 9的活性有关.
方法:采用不同浓度的HSJ作用K562细胞后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖抑制率;台盼蓝染色法绘制细胞生长曲线;Annexin V-FITC/PI双染法和TdT酶介导的末端缺失原位标记(TUNEL)法检测细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测BCL-2和BAX蛋白的表达;比色法检测caspase 3和caspase9的活性。
结果:HSJ对K562细胞的增殖抑制率随药物剂量增大而增加,作用48h后的IC50为1.35 mg/ml;HSJ作用后细胞生长曲线下移,细胞增殖能力明显下降;HSJ作用后细胞早期凋亡率和晚期凋亡率分别为(8.39±0.81)%、(8.88±1.12)%、(13.42±2.04)%和(26.51 ±3.02)%、(44.08±4.84)%、(54.4±3.73)%,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);K562细胞经HSJ作用后,BCL-2蛋白表达水平下降,BAX蛋白表达水平上升,caspase3和caspase9的活性增强,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05).
结论:HSJ对K562细胞具有增殖抑制作用;HSJ能够诱导K562细胞凋亡;其诱导凋亡作用可能与下调BCL-2蛋白表达水平,上调BAX蛋白表达水平,增强caspase3和caspase 9的活性有关.