【摘 要】
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目的:构建ZPKR的dsRBM1和dsRBM3的点突变体,分别使其丧失dsRNA结合作用但保留二聚化作用。方法:通过点突变技术分别构建了ZPKR的dsRBM123K61A,和dsRBM123K263A的点突变体,并
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目的:构建ZPKR的dsRBM1和dsRBM3的点突变体,分别使其丧失dsRNA结合作用但保留二聚化作用。方法:通过点突变技术分别构建了ZPKR的dsRBM123K61A,和dsRBM123K263A的点突变体,并进一步通过定向删除技术构建了dsRBM12K61A和dsRBM23K263A突变体;通过二聚化和Poly I:C Pull-down实验检测其功能差异。结果:点突变后四种突变体的二聚化作用并没有改变,但结合Poly I:C作用明显减弱或者丧失。结论:ZPKR的dsRBM1和dsRBM3的保守序列KKEAK的单个K突变为A后,并不改变其二聚化功能,但结合Poly I:C的功能丧失,为进一步研究体内ZPKR不依赖dsRNA的活化机制奠定基础。
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