玉米抗坏血酸过氧化物ZmAPX基因的克隆及表达分析

来源 :中国植物保护学会2014年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:niklausxiang
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  抗坏血酸过氧化物酶(APX)是植物叶绿体和胞质中清除H2O2系统的关键酶.前人研究发现,植物在遭遇干旱、高温、低温等恶劣环境均会诱导APX基因表达,然而,玉米ZmAPX基因在玉米遭受生物和非生物胁迫的表达却从未研究.因此,本研究利用NCBI网站的玉米APX基因序列,设计特异引物,以白交系掖478的cDNA为模板克隆APX基因,并进行生物信息学分析,进一步选择对玉米灰斑病菌抗感差异的白交系为试验材料,分析其接种玉蜀黍尾孢菌不同时间ZmAPX基因的表达情况.结果发现,ZmAPX基因cDNA全长753bp,编码251个氨基酸,起始密码子为ATG,终止密码子为TAA.根据Protparam软件分析,ZmAPX基因编码蛋白的理化性质,预测结果发现,ZmAPX基因编码蛋白的分子式C1220 H1894 N326 0367 S7,相对分子量约为27.2kD,等电点pl为5.18,理论推导半衰期为30h,不稳定参数为33.14,属于稳定蛋白.该蛋白中相对含量较多的氨基酸是丙氨酸( Ala)(28个,11.2%)、亮氨酸(Leu)(29个,11.6)、甘氨酸(Gly)(22个,8.8%)、脯氨酸(Pro)(18个,7.2%).总的带负电荷的残基(Asp+Glu) 36,总的带正电荷的残基(Arg+Lys)为26.亲水性平均数为-0.321,预测该蛋白为亲水蛋白,其脂肪指数为81.28.为了研究玉米抗坏血酸过氧化物酶ZmAPX基因在玉米抵御灰斑病菌侵染过程中发挥的作用,本研究分别对抗/感玉米灰斑病白交系接种玉蜀黍尾孢菌0天、5天、7天、9天,分析ZmAPX基因的表达变化,结果发现,感病的掖478接种玉蜀黍尾孢菌至第9天时,ZmAPX基因的表达量没有明显变化,然而,抗病白交系OH43HtN接种玉蜀黍尾孢菌第7天时表达量显著增加,由此推测,ZmAPX基因在OH43HtN抵御玉蜀黍尾孢菌侵染过程中发挥重要作用.因此,明确ZmAPX基因在玉米植株遭受生物和非生物胁迫发挥的作用,对培育优良的抗性玉米品种具有重要的理论指导意义.
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