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抗HIV-1感染药物的研究快速发展，目前，临床使用的抗HIV药物主要是逆转录酶抑制剂和蛋白质合成酶抑制剂。但是，由于这类药物价格昂贵、严重的副作用、毒性、耐药性等问题日益严重，发展新作用机理的抗HIV-1药物已成当务之急。因此，本课题以HIV-1病毒RNA核转运为靶点，建立了新型抗HIV药物筛选模型，以期寻找具有新作用机制的抗病毒药物。Rev蛋白即病毒颗粒蛋白表达调节因子，是HIV-1病毒复制非常重要的的一个反式激活因子，直接参与病毒蛋白的表达和病毒的增殖，其最为重要的生物学功能是参与HIV-1未剪辑mRNA和部分剪辑mRNA的核转运。鉴于Rev蛋白依赖性RNA核转运在病毒生活周期中重要的生物学功能，如能特异性地抑制这一核转运过程，且不影响宿主细胞自身的RNA出核通路，就会成为一新的抗HIV-1策略。根据这一思路，我们建立了以HIV-1病毒RNA核转运为靶点的新型抗HIV药物筛选模型。在筛选模型中，我们选择了由HIV-1病毒偏爱性密码子所编码的GFP(GFPHIV)作为报告基因，用于快速简便地分析样品对Rev依赖的RNA核转运的影响。为了模拟自然条件下HIV-1的非剪切RNAs的核转运状态，我们在GFPHIV编码序列上下游分别添加了含有HIV-1 SD序列的UTR序列和与Rev蛋白特异性结合的RRE序列，得到pUTR-GFPHIV-RRE。其中SD序列可以防止GFPHIV基因被细胞降解并得以顺利转录；RRE片段可以介导GFPHIV mRNA通过Rev-CRM1途径转运出核。当用pUTR-GFPHIV-RRE和Rev表达载体(pcDNA3-Rev)共转染细胞时，GFPHIV mRNA可通过RRE／Rev系统转运出核，GFPHIV得以表达。一旦Rev依赖的核转运系统受到抑制，则GFPHIV的表达水平下降。通过测定GFPHIV的荧光强度，就可以确定化合物对Rev依赖的核转运的影响。我们先后通过荧光显微镜观察、Western blot分析以及荧光强度测定等方法，证明了GFPHIV的表达受到RRE／Rev系统的有效调控。选取抑制剂为来普霉素B作为模型的阳性对照药物对本模型进行了初步评价，计算得出Z’因子为0.9602。对本所化合物库的800个化合物进行了初筛，阳性率为9.3％。上述结果初步证明了该模型可用于以HIV-1病毒RNA核转运为靶点的新型抗HIV药物的筛选。慢病毒的非剪辑mRNA和部分剪辑mRNA的核转运都是通过RRE／Rev或者类似的核转运途径来完成。本论文以病毒HIV-1的Rev蛋白为靶点建立的筛选模型，筛选得到的药物很可能对所有RRE／Rev或类似的核转运途径有抑制活性，因而可以发展成为有广谱抗病毒活性的药物。