【摘 要】
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本研究通过采集疑似猪伪狂犬病流产胎儿病料,采用细胞接毒分离培养、病毒蚀斑纯化、病毒的形态结构观察、易感动物接种试验和病毒核酸鉴定分离到一株伪狂犬病病毒,命名为PRV Guizhou-DY株(GenBank登录号为JX417716);为了摸清其理化特性,进一步对伪狂犬病病毒Guizhou-DY分离株进行了耐热、耐酸及脂溶性敏感性实验、核酸类型鉴定及病毒毒价测定,同时进行病毒致病性试验。分离鉴定结果表
【机 构】
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贵州大学动物科学学院,贵州贵阳,550025 贵州省动物疫病预防控制中心,贵州贵阳,550008
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会
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本研究通过采集疑似猪伪狂犬病流产胎儿病料,采用细胞接毒分离培养、病毒蚀斑纯化、病毒的形态结构观察、易感动物接种试验和病毒核酸鉴定分离到一株伪狂犬病病毒,命名为PRV Guizhou-DY株(GenBank登录号为JX417716);为了摸清其理化特性,进一步对伪狂犬病病毒Guizhou-DY分离株进行了耐热、耐酸及脂溶性敏感性实验、核酸类型鉴定及病毒毒价测定,同时进行病毒致病性试验。分离鉴定结果表明:病料接种Vero细胞盲传至第2代时产生明显CPE,盲传至第4代可出现稳定的CPE;病毒粒子在电镜下呈椭圆形、有囊膜、直径约为120～180 nm,核内可见呈晶格状排列的病毒包涵体;病毒悬液接种家兔能引起家兔奇痒、麻痹死亡;理化特性研究表明:该病毒是一种耐热不耐酸且对氯仿敏感的DNA病毒,gE全基因序列与PRV GZ-Z1株、Fa株及Ea株的同源性分别为97.6％、98.9％和99.4％,其TCID50为10-9.71/100μL,PFU/mL为109.攻毒组猪只体温升高,临床症状较为明显,在攻毒后5d开始出现中和抗体,21d达到最高。该研究可为病毒病原学的研究提供参考。
其他文献
本实验旨在构建A.margihale MSP1α和MSP1β蛋白的原核表达质粒，在大肠埃希菌中表达重组MSP1α和MSP1β蛋白，并对其特性进行初步研究，为进一步探索A.margihale对红细胞致病的分子机制及亚单位疫苗的研制奠定基础。本实验阐明了A.margihale中MSP1α和MSP1β重组蛋白可在大肠埃希菌外膜上获得有效表达，并确认了MSP1α和MSP1β蛋白在侵入红血球过程中起到黏附素
目的：为探讨携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门氏菌诱导山羊免疫应答效果。方法：本研究将60只黑山羊随机分为3组即重组细菌组、弱毒疫苗组和空白对照组,重组细菌组灌服重组减毒沙门氏菌,弱毒疫苗组股内侧皮内注射山羊痘弱毒疫苗,空白对照组不作任何处理;于不同时间段采集山羊血液、呼吸道/消化道分泌液及组织样本进行检测。结果:(1)在免疫后7d、15d、30d和45d的山羊消化道SIgA含量中,重组细
为分析2012年河南省猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本研究设计合成2对扩增S1基因的特异性引物,利用RT-PCR方法,对2012年分离的5株PEDV毒株的S1基因进行扩增、克隆和序列测定,并对其进行遗传进化分析。结果表明:5株PEDV S1基因核苷酸同源性为98.3％～99.5％,氨基酸同源性为97.1％～98.9％。与2012年国内登陆的PEDV流行株相比较核苷酸同源性为97.8％
A cDNA clone of a genotype 4 swine hepatitis E virus (HEV) strain (SAAS-FX17),identified in Shanghai,has been constructed.Capped RNA transcripts were prepared in vitro and shown to be replication-comp
为进一步摸清泰州地区猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)的感染情况及危害程度,控制该病在泰州地区的流行,应用PCR方法对泰州所辖6个市区近两年116份病料进行PCV2的病原学检测。结果总阳性率为53.45％,每个地区都存在一定程度的感染。其中规模化养猪场阳性率为48.33％,散养户阳性率为58.93％。可见,PCV2在泰州地区猪群中普遍存在,应引起注意。
本研究开展了猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因的B、C抗原位点区域的原核表达与免疫活性研究。根据S基因的B、C抗原位点区序列设计一对引物,从S基因克隆质粒19T-S1扩增了含B、C抗原位点的基因片段(以SBC表示).将SBC插入pMD19-T载体构建了19T-SBC,再用EcoRⅠ/HindⅢ酶切SBC亚克隆至pET-32a(+)构建了重组质粒pET-32a-SBC.将pET-32a-SBC转入
为定量检测猪细环病毒1型(TTSuV1),建立了检测TTSuV1核酸的SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法。构建含有TTSuV1基因249 bp片段的重组质粒,用该重组质粒进行SYBR GreenⅠreal-time PCR,来建立定量检测TTSuV1核酸的标准曲线与直线回归方程。结果显示,该方法的线性关系良好,相关系数达0.999以上;最低可检测到至少6.3×101拷贝/μL的核酸模板;重复
本研究以重组杆状病毒表达的PCV2-rRep和-rRep’蛋白及PCV2-rCap蛋白制备亚单位苗，同时利用PCV2全病毒制备的灭活苗，在相同条件下进行鼠体免疫攻毒试验，旨在比较各自的免疫原性和攻毒保护性。以PCV2-rRep和-rRep’蛋白亚单位疫苗免疫应答结果表明，这2种复制酶蛋白均具有良好的免疫原性，能够诱导机体产生高水平的抗体滴度，但在鼠体攻毒模型中对PCV2感染无任何保护性，用各自的免
将PCV2 ORF2基因插入到PRV通用载体pG中,利用脂质体LipofectamineTM2000试剂盒将重组转移质粒pGO与猪PRV弱毒HB98株DNA共转染猪睾丸(ST)细胞,通过3轮蚀斑纯化重组病毒。将重组病毒、商品化PCV2灭活苗及DMEM培养液分别免疫6周龄雌性昆明小鼠,4周后加强免疫一次,一免后第八周用PCV2强毒NY株对小鼠进行攻毒。首免重组病毒后小鼠体内抗PCV2的ELISA抗体
为探讨猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2/猪白介素-2(PoIL-2)嵌合重组表达质粒(rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2)在猪体内的免疫效果和免疫保护效果从而研制高效PCV2核酸疫苗,本研究将35只10日龄健康仔猪平均分成7组以进行rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2重组表达质粒或PCV2 ORF2基因原核表达的rCap蛋白免疫及免疫保护试验。共进行4次