Id1通过AKT/mTOR信号通路对骨肉瘤细胞MG63生物学行为及成骨分化的调控

来源 :2019中国肿瘤学大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:q365709285
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  目的 探讨Id1 通过AKT/mTOR 信号通路对人骨肉瘤细胞MG63 生物学行为及成骨分化的影响。方法 采用构建有重组腺病毒AdsiId1,单独或联合mTOR 抑制剂处理人骨肉瘤细胞MG63,分为Control 组(DMSO 组)、mTOR 抑制剂组(Rapamycin 组)、siId1 组(AdsiId1 感染组)、siId1+Rapamycin 组(Ad siId1+Rapamycin 组),观察细胞荧光表达情况并以RT-PCR 和Westernblot 验证Id1 mRNA 和蛋白表达情况;CCK-8 检测MG63 细胞增殖;Transwell 实验检测MG63 细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测MG63 细胞周期、凋亡;ALP 染色检测细胞早期成骨能力,茜素红染色检测细胞晚期成骨能力;运用透射电镜及mGFP-RFP-LC3 双荧光质粒转染检测细胞自噬水平;Western blot 检测自噬关键蛋白表达情况及AKT/mTOR 信号通路的表达情况。
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