【摘 要】
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目的 建立一种能快速鉴定炭疽杆菌的检测技术。方法 1.首先根据炭疽杆菌染色体上的2个靶点TJHP和BA5345分别设计2对引物和探针;2.然后用所设计的4对引物及其探针对10份已知浓
【机 构】
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大理大学公共卫生学院;云南省地方病防治所云南省自然疫源性疾病防控技术重点实验室;中国疾控中心传染病预防控制所;
【基金项目】
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云南省医学学科带头人培养对象(D-201652);云南省中青年学术和技术带头人后备人才培养项目(2014HB037)
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目的 建立一种能快速鉴定炭疽杆菌的检测技术。方法 1.首先根据炭疽杆菌染色体上的2个靶点TJHP和BA5345分别设计2对引物和探针;2.然后用所设计的4对引物及其探针对10份已知浓度的炭疽杆菌DNA和一定数量的阴性对照菌株DNA进行检测;3.将浓度最大的炭疽杆菌DNA进行10倍浓度梯度稀释,检测4对引物及其探针的灵敏度;4.选出2对针对TJHP和BA5345 2个靶点的特异性强其灵敏度高的引物及其探针进行重复性实验,建立快速筛查炭疽杆菌的检测方法。结果 1.4对引物及其探针特异性强,只能扩增炭疽杆菌DNA;2.TJHP2和BA5345-1 2对引物的灵敏度为4.513×10-5ng/uL;3.重复性实验结果无明显差异(t=1.178,P=0.332),建立的快速检测方法稳定性良好。结论 TJHP2和BA5345-1 2对引物及其探针可用于炭疽杆菌感染初期的快速筛查以及临床辅助诊断。
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