乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA(hepatitis B virus covalently closed circular DNA，HBVcccDNA)是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)复制的中间体，是HBV mRNA和前基因组RNA合成的模板。在HBV生活周期中，HBV cccDNA的形成是关键的一步，是HBV持续感染的关键因素，也是指导乙肝抗病毒治疗的重要依据。Southern blot是检测HBV cccDNA的经典方法，但其检测过程复杂，技术要求高，操作可控性差，且灵敏度不高。为了提高HBVcccDNA检测的灵敏度和特异性，研究者开发了多种分子生物学检测方法，尤其是聚合酶链反应(PCR)技术，但由于HBVcccDNA在细胞内的含量较低及同源DNA的干扰，其检测结果不是很理想。近年来，荧光定量PCR技术极大的提高了HBVcccDNA检测的灵敏度和特异性，而新的荧光探针和荧光引物技术使准确检测HBV cccDNA成为可能。本文介绍其研究进展。