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【目的】猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的主要病原,其广泛流行给世界养猪业带来了巨大的损失。PCV2感染能导致病猪脾脏、淋巴结、肺脏及血液中IL-10表达上调。此外,PCV2感染体外培养的外周血淋巴细胞和树突状细胞等也可导致IL-10生成。但PCV2途径调控细胞IL-10表达的分子机制目前仍不清楚。【材料方法】本研究以PCV2感染体外培养的猪肺泡巨噬细胞,ELISA、real time-PCR和启动子活性检测等检测IL-10表达的动力学变化;Western blotting检测巨噬细胞中IL-10表达调控相关信号传导途径中关键蛋白的表达情况;Ch IP检测不同核转录因子与IL-10启动子的结合情况;分别以PCV2主要组分蛋白作用猪肺泡巨噬细胞,检测PCV2调控IL-10表达的关键组分以及相关信号途径。【结果】ELISA结果显示PCV2感染猪肺泡巨噬细胞显著上调IL-10表达,且IL-10启动子活性增强。动力学研究表明,PCV2感染细胞后24h内,细胞培养上清中IL-10持续表达,IL-10 m RNA于感染后30 min至3h,以及感染后12 h两次上调。Western blotting结果显示,PCV2感染后IκB磷酸化显著增加,且细胞核内NF-κB p50亚基表达量显著上调;同时巨噬细胞内与IL-10表达相关的信号分子PI3K/Akt、p38 MAPK和ERK等均于不同时间点显著磷酸化。Ch IP试验检测各活化信号途径中核转录因子与IL-10启动子的结合,结果表明p50、AP1、CREB、Sp1等均与IL-10启动子结合活性增加。分别以PCV2 Rep、Cap和ORF3作用细胞,ELISA、western blotting及启动子活性检测显示Rep和Cap能上调IL-10表达,而在PCV2感染猪肺泡巨噬细胞中只能检测到Cap的表达。同时,western blotting检测表明,PCV2 Cap能激活PI3K/Akt、p38 MAPK和ERK等信号途径。【结论】上述结果表明,PCV2感染猪肺泡巨噬细胞能激活NF-κB、PI3K/Akt、p38 MAPK和ERK信号途径,并通过其相关的核转录因子显著上调IL-10表达,且PCV2主要通过Cap发挥上调IL-10表达的作用。