【摘 要】
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本研究从深圳市两名耐拉夫米定治疗的慢性乙型肝炎病人血清中提取HBV DNA,采用PCR方法在HBV负链开环缺口处及基因组中单一酶切点(Spe Ⅰ)处设计两对引物从两个方向分别扩增1.15kb和2.05kb的单链及双链DNA区,利用基因重组技术,将两片段经酶切及连接后克隆至质粒pCDNA3.1中获得HBV3.2Kb的全基因.经错配PCR(mismatched polymerase chain rea
【机 构】
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深圳市东湖医院中西医结合肝病中心,广东深圳,518020 武汉大学医学院病毒所分子病毒室
【出 处】
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第一次全国中西医结合传染病学术会议
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本研究从深圳市两名耐拉夫米定治疗的慢性乙型肝炎病人血清中提取HBV DNA,采用PCR方法在HBV负链开环缺口处及基因组中单一酶切点(Spe Ⅰ)处设计两对引物从两个方向分别扩增1.15kb和2.05kb的单链及双链DNA区,利用基因重组技术,将两片段经酶切及连接后克隆至质粒pCDNA3.1中获得HBV3.2Kb的全基因.经错配PCR(mismatched polymerase chain reaction)结合限制性片段长度多态性(RFLP)分析及DNA序列测定,证实克隆所得为HBVYIDD变异株全基因组.为下一步构建含双体HBVYMDDDNA的质粒进行进一步HBV变异毒株的研究以及为HBVYMDD变异株细胞模型的构建和中药筛选研究奠定基础.
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