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主要由葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)引起的猕猴桃果实熟腐病(简称果腐病)是猕猴桃果实近成熟期至贮藏期的重要真菌病害。将葡萄座腔菌接种猕猴桃抗病品种"金艳"和感病品种"红阳",采用RNA-seq技术对接种样品进行转录组测序,通过分析比较筛选出与抗果腐病相关的3个木葡聚糖内糖基转移/水解酶(XTH)基因,即XTH5、XTH7和XTH14。对这3个基因进行克隆,编码产物分析和表达量检测,以此来探究该基因与抗病之间的联系。(1)XTH基因克隆。利用RT-PCR技术从抗病品种"金艳"猕猴桃中克隆出XTH5、XTH7和XTH14三个基因的全长ORF序列,该序列与GenBank中来自美味猕猴桃的对应序列均具有90%以上的同源性,其中同源性最高为99%。(2)XTH基因的生物信息学分析。通过对XTH5、XTH7和XTH14三个基因建立系统发育树、进行氨基酸序列理化性质分析、疏水区/亲水区预测、信号肽和跨膜结构分析、以及蛋白质二级、三级结构的预测与分析,得知XTH5、XTH7基因编码产物的理化性质及功能较为相似,而XTH14基因编码产物与以上两个基因存在较大差异。根据前人的研究可以判断三个基因均发挥XTH活性,但是,XTH14基因编码产物的loop 2长度与以上两个基因的编码产物不同,推断其功能也存在差异。(3)分别对抗病品种"金艳"和感病品种"红阳"的XTH5、XTH7和XTH14基因进行实时荧光定量PCR分析,结果表明"金艳"相比"红阳"XTH5和XTH7基因表达水平更高;而对于XTH14基因,感病品种"红阳"的XTH14基因表达水平更高,尤其是在第6天,而抗病品种"金艳"的变化则不明显。经过前人的研究分析已知这些XTH基因的功能与果实软化相关,XTH在果实生长和成熟期间与维持植物细胞壁的结构完整性有重要关系。由此表明,感病品种"红阳"在遭受葡萄座腔菌侵染的过程中所产生的这些XTH基因的差异表达,会使其果实比抗病品种"金艳"更容易软化,最终导致葡萄座腔菌在"红阳"中更容易扩展。综上所述,XTH基因与猕猴桃果实熟腐病的发病严重与否有着重要关系,其差异表达类型以及表达水平的高低是影响猕猴桃抗果实熟腐病程度的重要因子。