【摘 要】
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目的：验证小鼠损伤脊髓中高表达的microRNA-21(miR-21)在neuro-2a细胞中对程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的作用,初步探讨miR-21在脊髓损伤过程的作用.方法：将neuro-2a细胞在
【机 构】
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100048 北京 首都地区军队急救中心 解放军总医院第一附属医院急救部
【出 处】
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第三届全国创伤急救与多发伤学术会议
论文部分内容阅读
目的：验证小鼠损伤脊髓中高表达的microRNA-21(miR-21)在neuro-2a细胞中对程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的作用,初步探讨miR-21在脊髓损伤过程的作用.方法：将neuro-2a细胞在体外培养16小时,分别按相应体系转染miR-21 mimics,继续培养48小时,提取6孔板内细胞总蛋白和总RNA行蛋白印记和实时定量PCR检测,利用HEK293细胞行荧光素酶报告基因检测.结果：neuro-2a细胞转染miR-21 mimics后,其内源性PDCD4的表达在蛋白和mRNA水平均明显降低.双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-21对PDCD4 3-UTR的预测位点有直接抑制作用,而将此位点突变后,miR-21对PDCD4 3-UTR预测位点的抑制作用消失.结论：miR-21通过直接作用于PDCD4 3-UTR靶位点从而在mRNA和蛋白水平抑制PDCD4的表达.miR-21可能在脊髓损伤过程中具有重要的保护作用.
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