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目的：探讨甲基化酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中MG MT基因甲基化水平、mRNA及蛋白表达的影响.方法：用不同浓度5-Aza-CdR处理结直肠癌细胞株HT-29和LoVo.应用TaqMan探针为基础的实时定量PCR(Methylight)方法、SYBR Green PCR方法及蛋白印迹实验(Western blot)检测药物处理前后HT-29和LoVo细胞中MG MT基因的甲基化状态、mRNA和蛋白表达.结果：Methylight检测HT-29和LoVo细胞中MGMT蛋白在药物作用后异常甲基化得到逆转；实时荧光定量PCR和Western Blot检测到0.5、1.0、1.5μmol/L5-Aza-CdR处理后MGMT基因mRNA和蛋白重新表达,实时荧光定量PCR检测对照组和不同浓度实验组在HT-29细胞株相对表达量分别为(1.000±0.000),(1.121±0.125),(2.307±0.254)和(3.214±0.303)；在LoVo细胞株相对表达量分别为(1.000±0.000),(1.118±0.021),(1.439±0.144)和(2.768±0.382).Western-blot检测MGMT蛋白在对照组和不同浓度实验组中HT-29细胞株相对表达量分别为(0.460±0.033),(0.829±0.027),(0.935±0.041)和(1.182±0.051)；LoVo细胞株相对表达量分别为(0.363±0.045),(0.385±0.039),(0.643±0.049)和(0.673±0.029).以上作用均呈时间、剂量依赖性,MGMT基因mRNA在HT-29细胞株表达(F=73.821,P=0.000)和LoVo细胞株表达(F=41.659,P=0.015)具有统计学意义.MGMT蛋白表达在HT-29细胞株表达(F=177.062,P=0.000)和LoVo细胞株表达(F=51.280,P=0.000)亦具有统计学意义.结论：结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中MGMT启动子甲基化可能是导致该基因表达下调甚至失活的主要原因.5-Aza-CdR能够较成功的逆转结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中MG MT基因的甲基化状态,并能恢复mRNA及蛋白重新表达.