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目的:研究IL-17+Th17细胞与IL-17+IFN-γ+Th17细胞的特征性分泌因子IL-17/IFN-γ对原代成骨细胞增殖和分化的作用,探讨不同表型Th17细胞特征性分泌因子IL-17/IFN-γ在牙周病变进展过程中协同或拮抗作用以及它们对牙槽骨改建的影响。方法:采用酶消化法分离培养出生24h的小鼠乳鼠颅骨成骨细胞,通过茜素红染色鉴定成骨细胞,实验分组为正常对照组,诱导组以及在此基础上的IL-17干预组,IFN-γ干预组和IL-17/IFN-γ联合干预组,MTT法检测24h,48h,72h,96h原代成骨细胞的增殖活性,ALP活性检测各组碱性磷酸酶活性差异,real time-PCR检测各组1d,3d,5d,7d骨保护素(OPG),核因子k B受体(RANKL),ALP,骨钙素(OCN),Runt相关转录因子2(RUNX2)m RNA表达差异。结果:倒置显微镜下观察成骨细胞多为单核、多边形及梭形,体积较大,局部有细胞密集的细胞团,茜素红染色将钙化结节染成红色;MTT结果显示IL-17,IFN-γ以及联合组均能促进细胞增殖,且72h,96h IFN-γ的细胞增殖速度明显快于其他实验组,而联合组的细胞增殖速度快于IL-17组;ALP活性结果显示3d时,实验组成骨细胞活性高于单纯诱导组,且IFN-γ组高于联合组,联合组高于IL-17组;PCR结果显示IL-17组RANKL m RNA表达水平高于其他组,而联合组介于IL-17组和IFN-γ组之间,IFN-γ组ALP,OPG,OCN,RUNX2m RNA表达水平高于联合组和IL-17组,但实验结果与作用时间无关。结论:不同表型Th17细胞特征性分泌因子对成骨细胞增殖分化均有一定影响,IFN-γ促进成骨细胞增殖分化,IL-17作用不明显,而IL-17和IFN-γ对成骨细胞增殖分化方面具有相互拮抗作用,有助于进一步研究不同表型Th17细胞及其特征性分泌因子在牙槽骨改建中的作用机制。