【摘 要】
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目的:建立一套自动化程度高,适应性强的生物基质中活性多肽在线固相萃取-液质联用(on-line SPEHPLC/MS)的定量分析系统。方法:利用Agilent 1100 ChemStation软件和Finnigan X
【机 构】
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军事医学科学院放射与辐射医学研究所生物技术药物代谢实验室;
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目的:建立一套自动化程度高,适应性强的生物基质中活性多肽在线固相萃取-液质联用(on-line SPEHPLC/MS)的定量分析系统。方法:利用Agilent 1100 ChemStation软件和Finnigan Xcalibur软件程序控制在线固相萃取的活化、进样、淋洗、控制柱切换、洗脱和检测过程,建立适用于各种性质多肽定量分析的on-lineSPE HPLC/MS系统。结果:On-line SPE HPLC/MS系统的固相萃取系统(包括SPE填料、样品上样条件、SPE柱洗脱方式等),液相分析系统(包括色谱柱的种类、流动相种类和梯度等)和质谱检测系统(包括源内参数、离子改性剂的添加、SRM离子的选择等)对生物基质中活性多肽定量分析均有不通程度的影响,对于复杂生物基质中不同性质多肽需要根据其等电点逐步优化。方法学确证研究表明,对于不同性质的多肽其线性、检测限、精密度和准确度等指标均能满足药代动力学研究要求。结论:On-line SPE HPLC/MS系统的适应性广、自动化程度高,集样品前处理技术和样品分析技术为一体,为复杂基质中活性多肽的精确指认和定量分析提供了新的解决方案,为快速建立生物基质中活性多肽的药代动力学研究方法提供了依据。
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