钛表面接枝聚乙二醇分子刷抑制细菌粘附的研究

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目的:采用表面引发原子转移自由基聚合反应(SI-ATRP)在钛片表面接枝亲水性的聚乙二醇分子刷,抑制细菌对其表面的粘附。方法:钛片打磨抛光,将其放入氨丙基三乙氧基硅烷的无水甲苯中室温反应18h,然后用甲苯、二氯甲烷超声清洗各两次,使钛片表面氨基化。用无水二氯甲烷作溶剂,三乙胺作催化剂,将表面氨基化的钛片与2-溴异丁酰溴反应24h,用二氯甲烷、乙醇、双蒸水超声清洗各两次,完成钛片表面引发剂的固定。将固定有引发剂的钛片放入含6个乙二醇重复单位的聚乙二醇甲基丙烯酸酯、双蒸水、N,N,N’,N’’,N’’-五甲基二乙烯三胺、溴化亚铜的混合溶液中,在氩气保护下室温反应48h,在钛表面接枝聚乙二醇甲基丙烯酸酯(PEGMA)分子刷。用静态接触角和XPS对接枝有PEGMA分子刷的钛片进行表征与分析。以纯钛为对照组、接枝PEGMA分子刷的钛片为实验组,将变形链球菌和内氏放线菌在纯钛和改性钛表面上培养4h和24h,用荧光显微镜和扫描电镜评价其对两种菌的抗初期抗粘附和抗细菌生物膜形成的能力。结果:固定有引发剂的钛片静态接触角为80°,而接枝有PEGMA的钛片接触角降为45°;XPS结果显示:氨基硅烷化后的钛表面除钛、氧元素的特征峰外,还出现了硅和氮元素的特征峰;而与2-溴异丁酰溴反应后,则出现了溴的特征峰;接枝PEGMA后,XPS的谱图与接枝引发剂的谱图相近,但溴元素的峰几乎消失,半定量的表面元素分析结果显示,改性钛表面的氧元素和碳元素的含量增加。荧光显微镜观察显示:无论是变形链球菌还是内氏放线菌,经4h小时培养后,纯钛表面粘附有大量活菌,而接枝有PEGMA分子刷的钛片表面,两种细菌的数量明显减少且散在分布。细菌培养24h后,纯钛表面粘附的细菌进一步增加,而接枝PEGMA分子刷的钛片表面,两种细菌数量数量较少且散在分布。扫描电镜显示:经4h细菌培养,纯钛表面分布有大量的细菌,但未相互堆积成块,细菌形态正常饱满,而接枝PEGMA分子刷的钛片表面,两种细菌数量都明显减少,且散在分布。24h细菌培养后,纯钛表面细菌大量堆积,相互交联成团块,而接枝有PEGMA分子刷的钛片细菌数量仍较少,较4h无明显增加,细菌之间无交联且散在分布。结论:采用SI-ATRP在钛表面成功接枝具有亲水性能的PEGMA分子刷。经该方法改性的钛表面能显著抑制变形链球菌及内氏放线菌的初期粘附和细菌生物膜的形成。
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