七氟烷对低温环境失血性休克猪肠粘膜AQP8的影响

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目的评价七氟烷对低温环境失血性休克猪肠损伤的保护作用及肠黏膜水通道蛋白8(Aquaporin 8,AQP8)的影响。方法清洁级巴马小型猪24头,体重20~25kg,雌雄不限,采用随机数字表法,将其分为3组(n=8):假手术组(S组),失血性休克组(HS组),七氟烷组(Sev组)。采用容量控制法制备低温环境下失血性休克模型。术前肌注兽用速眠新Ⅱ号0.15~0.20 ml/kg麻醉诱导气管插管,机械通气。潮气量11ml/kg,呼吸频率16bpm,吸入氧浓度30%。左股动脉穿刺置管连接压力转换器测量平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)及心率(heart rate,HR)。右股动脉剖开置入聚乙烯导管以备采血、放血和血气分析。所有切口用0.75%罗哌卡因浸润阻滞。右颈内静脉穿刺置入7.5F肺动脉漂浮导管,监测中心体温。S组仅穿刺置管;HS组穿刺后制备HS模型;Sev组HS模型制备成功后30min吸入2%七氟烷30min。穿刺置管完成后置清醒猪于-15℃冰柜中。分别在休克前(T0)及休克后0.5h(T1)、1h(T2)、1.5h(T3)、2h(T4)、3h(T5)、4h(T6)监测并记录各组平均动脉压(MAP)、心率(HR)和中心温度,并留取动脉血检测各时点TNF-a、IL-6和SOD。取肠组织,光镜下观察肠组织病理学结果,并测定肠湿/干重比。Western-blot检测肠组织中AQP8表达水平。ELISA法检测血清肠脂肪酸结合蛋白(Intestinal fatty acid binding protein,I-FABP)的变化。结果与S组相比,HS组、Sev组T1时点后MAP均显著下降,HR均显著增快(P<0.05)。与HS组相比,Sev组MAP变化差异无显著性意义(P>0.05),HR则明显减慢(P<0.05);4h内,S组和HS组中心温度分别从38.75±0.71℃和38.67±0.75℃下降到37.24±0.61℃和34.48±0.47℃,两组在T4后有显著差异(P<0.05);与HS组相比,Sev组在T1-T3明显降低(P<0.05);T4后差异无显著性意义(P>0.05)。与S组比较,HS组、Sev组血清TNF-α、IL-6、I-FABP水平及肠组织含水量、AQP8表达显著增高(P<0.05),血清SOD水平降低(P<0.05);与HS组比较,Sev组血清TNF-α、IL-6、I-FABP水平及肠组织含水量、AQP8表达降低,(P<0.05),血清SOD水平升高(P<0.05);Sev组肠组织病理学损伤明显轻于HS组。结论七氟烷可减轻低温环境下失血性休克猪肠损伤,其机制可能与抑制炎症反应和下调AQP8表达有关。
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