基于镧系金属双功能探针的蛋白酶活性原位成像和ICP-MS定量新方法

来源 :第34届(2016)中国质谱学会学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:galatea
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  动态可视化的定量分析生命体中重要的调控分子,对生物学和临床研究具有重要的意义.荧光成像方法由于其优异的时空分辨率,非常适合用于生物分子和生物过程的实时监测.然而,荧光物质容易受到环境因素和生物体自发荧光的影响,限制了其在定量分析中的应用.电感耦合等离子体质谱(ICP-MS),由于其在复杂样本中低至ppt级的灵敏度和覆盖9个数量级的线性范围,在蛋白质以及DNA的定量检测中具有广泛的应用潜力1-2.基于此,我们利用镧系金属独特的光学性质以及在ICP-MS中良好的响应性能,创新性的发展了一种基于镧系金属的双功能探针.我们将镧系金属发光螯合物通过蛋白酶特异的底物肽段,连在纳米金颗粒的表面.通过细胞内蛋白酶对作为桥联剂的底物肽段的水解作用,调控螯合物发光成像并释放镧系金属.借助ICP-MS对释放的镧系金属进行准确而灵敏地定量分析,首次得到了肿瘤细胞内caspase-3在不同条件下活性变化的荧光定位成像和准确定量信息.
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