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本课题利用16S rRNA V3高变区测序和传统微生物分离纯培养方法分析日本鳗鲡小肠共生微生物的多样性.两种方法均表明在日本鳗鲡小肠黏膜和内含物中,细菌占整个小肠共生微生物的98％以上.主要的优势菌群为变形菌门Proteobacteria和厚壁杆菌门Firmicutes,这两个门的细菌占日本鳗鲡小肠细菌总量的70％以上,此外,还有酸杆菌门Acidobacteria、拟杆菌门Bacteroidetes、疣微菌门Verrucomicrobia、梭杆菌门Fusobacteria、绿弯菌门Chloroflexi、芽单胞菌门Gemmatimonadetes、浮霉菌门Planctomycetes、蓝藻门Cyanobacteria、硝化螺旋菌门Nitrospirae.变形菌门由气单胞菌属Aeromonas、希瓦氏菌属Shewanella、克雷伯氏菌属Klebsiella、肠杆菌属Enterobacter、柠檬酸杆菌属Citrobacter、埃希氏杆菌属Escherichia不动杆菌属Acinetobacter组成.厚壁菌门Firmicutes,包括乳球菌属Lactococcus、肠球菌属Enterococcus.比较两种方法,传统分离纯培养方法所分离到的单克隆菌属类似高通量测序结果,它对日本鳗鲡小肠共生微生物的分离鉴定进一步支持了高通量测序分析的结果,暗示结合两种方法将能够更全面、深入的分析日本鳗鲡肠道微生物多样性.
其次，日本鳗鲡在养殖过程中由于密度大、产量高，容易导致其受到病害的威胁。为了解决这个问题以及不使用副作用大的抗生素，我们结合微生物传统分离培养结果以及益生菌乳酸菌的生理功能和抗氧化活性，将分离到的乳酸菌同基础饲料混合饲喂日本鳗鲡，利用血液生化分析仪进行血液生化指标的测定。结果表明，日本鳗鲡能够通过提高总蛋白(totalprotein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)、球蛋白(globulin,GLO),葡萄糖(glucose,GLU)以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)等指标来增强机体的免疫力，揭示肠道潜在益生菌对日本鳗鲡抗病力的影响。同时，所获得的菌种能开发成高效微生态制剂、有利于我省特色品种一鳗鲡的绿色高效养殖。