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目的：通过特异性HER-2 siRNA对BT-474细胞抑制作用的实验研究为RNAi技术用于乳腺癌的防治提供基础的实验依据。
方法：设计并构建3种特异性HER-2 siRNA质粒(pRNAT-U6.1／Neo-siRNA-1、pRNAT-U6.1／Neo-siRNA-2及pRNAT-U6.1／Neo-siRNA-3)和1种无关序列质粒(pRNAT-U6.1／Neo-siRNA-neg)。在阳离子脂质体介导下，用重组质粒转染HER-2过表达的人乳腺癌BT-474细胞株，筛选出稳定转染重组质粒的细胞株，分别用RT-PCR法和westem blot法检测特异性HER-2 iRNA对BT-474细胞HER-2 mRNA和蛋白表达的影响，用MTT法检测对细胞生长的抑制作用。
结果：在阳离子脂质体介导下，用重组质粒转染BT-474细胞，成功筛选出阳性稳定转染重组质粒的细胞株。RT-PCR方法检测结果显示：siRNA-1组和siRNA-2组细胞HER-2 mRNA水平与阴性对照组相比显著降低(P<0.05)，抑制率分别达到61.04％和41.05％，而无关序列siRNA-neg组HER-2 mRNA水平与阴性对照组比较无显著下降。Western blot方法检测结果示：siRNA-1组和siRNA-2组细胞的HER-2蛋白水平与阴性对照组相比显著降低(P<0.05)，抑制率分别达到59.34％和38.01％，空质粒组和负对照组HER-2蛋白水平略有下降，但其HER-2蛋白抑制率和阴性对照组之间无显著性差异。MTT法测定结果显示：siRNA-1组与阴性对照组相比能显著地抑制BT-474细胞增殖(P<0.05)，而siRNA-neg对BT-474细胞增殖的影响与阴性对照组相比无显著性差异。
结论：本实验中证明了特异性HER-2 siRNA能特异性下调BT-474细胞中HER-2基因水平和蛋白水平的表达，显著抑制BT-474的生长。该实验为RNAi治疗乳腺癌提供了一定的实验依据。