铜绿微囊藻肌尾噬藻体(MaMV-Dc)的分离培养、超微形态及部分特性分析

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铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)是危害十分普遍而严重的水华蓝藻。噬藻体是对蓝藻有专一、致死性感染的病毒,可调控水华蓝藻的密度与种群结构,一定程度减少甚至消除蓝藻水华的发生。为此,我们开展了针对微囊藻噬藻体的分离培养、超微形态及其特性的研究,主要进展如下:将从滇池微囊藻爆发水域所采集的水样进行过滤后,分别接种到有不同水华蓝藻纯培养物的24孔细胞板中,光照培养两周或以上;随后选取由蓝绿色转变为清亮的孔中样品(显微观察证实这些样品中的藻细胞的确已裂解),继续进行多轮分离并收集噬藻体裂解液;采用噬藻体裂解液接种到铜绿微囊藻铺双层琼脂平板的方法,当噬菌斑形成后,分别挑斑再进行单斑扩增培养。经差异与超速离心及超微观察,确定获得一株肌尾噬藻体,并根据该噬藻体的宿主藻种类、超微形态及水样采集的水域,将其称之为滇池铜绿微囊藻肌尾噬藻体(Microcystis aeruginosa myxovirus fromLake Dianchi,MaMV-Dc)。负染电镜图像显示MaMV-Dc头部为直径70 nm的正二十面体,带有长为160 nm可收缩的尾;超薄切片电镜观察显示:感染藻细胞内有子代病毒颗粒增殖,且细胞基质比正常对照细胞电子密度稀疏。分别测定了MaMV-Dc的一步生长曲线及噬藻体感染后的宿主藻培养物生长曲线,结果显示感染5天后噬藻体的感染单位从6.01×10~6/ml增加到1.02×10~9/ml,而藻细胞的浓度从1.28×10~7个/ml下降为7×10~4个/ml。对MaMV-Dc的基因组与结构蛋白的进一步分析正在进行中。
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