UPS/SUMO系统在异氟醚预处理诱导的神经保护中的作用和机制

来源 :全国第三次麻醉药理学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:javajava2010
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  目的:探讨UPS/SUMO系统参与异氟醚预处理在细胞氧糖剥模型和大鼠局灶性脑缺血模型所诱导的神经保护中的作用。方法:(1)加入视黄酸(RA)将入神经母细胞瘤细胞株(SH-SHY5Y)诱导分化成为类神经元细胞,根据神经元特异性标志物NeuN和βⅢ-tublin的表达确定诱导分化的最佳时间。(2)制备细胞氧糖剥夺模型(OGD),通过流式细胞仪(Flow cytometry)以及检测细胞活性(MTT)确定异氟醚预处理的神经保护作用。采用Western blot观察细胞吸醚和缺氧后不同时间点结合性及游离性SUMO、Ubc9、Ubciquitin的表达变化。(3)采用慢病毒感染以及siRNA干扰技术过表达或敲除细胞Ubc9蛋白表达,观察对异氟醚神经保护作用的影响。(4)异氟醚预处理采用大脑中动脉阻闭(MCAO)法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。不同时间点观察神经功能学评分(NBS)、脑梗死容积、UPS/SUMO系统中各类蛋白表达变化。(5)术前给予大鼠侧脑室注射siRNA下调脑组织Ubc9表达,MCAO后观察神经功能学评分和脑梗死面积,观察对异氟醚预处理神经保护作用的影响。结论:异氟醚预处理通过调节UPS/SUMO系统的蛋白表达,从而产生神经保护作用。
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