【摘 要】
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目的:探讨转化生长因子1(Transforming Growth Factor-1,TGF-1)在骨形成蛋白9(Bone Morphogenetic Protein9,BMP9)诱导间充质干细胞成骨分化过程中的作用. 方法:应用鼠间
【出 处】
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第十届中国南方骨质疏松论坛暨重庆市医学会骨质疏松年会
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目的:探讨转化生长因子1(Transforming Growth Factor-1,TGF-1)在骨形成蛋白9(Bone Morphogenetic Protein9,BMP9)诱导间充质干细胞成骨分化过程中的作用.
方法:应用鼠间充质干细胞C3H10T1/2,以重组腺病毒法将BMP9导入,施加TGF-1处理,建立BMP9联合TGF-β1诱导间充质干细胞成骨分化模型.改良SEAP化学发光法检测碱性磷酸酶 (Alkaline Phosphatase,ALP)活性；茜素红S染色进行钙盐沉积检测；实时荧光定量PCR检测成骨相关基因Ⅰ型胶原(CollagenⅠ,COLⅠ)、骨桥素(Osteopotin,OPN)、骨钙素(Osteocalcin,OCN)的mRNA转录表达水平，免疫细胞化学法检测细胞内OPN、OCN表达变化。荧光素酶报告基因法检测信号通路的Smad水平。
结果：TGF-1与BMP9联合处理较BMP9单独处理能更早更多地提高ALP活性和引起钙盐沉积(F处理=18782.10，P=0.000)，持续处理达17天后不再显示明显差异，TGF-1单独处理与对照组间无明显差异(F=1.03，P=0.318)。TGF-1与BMP9联合处理较BMP9单独处理可使COLⅠ、OPN、OCN mRNA转录水平明显增高(COLⅠ的F处理=250.30，P=0.000；OPN的F处理=795.64，P=0.000；OCN的F处理=206.55，P=0.000)，COLⅠ增高发生较早和显著(F=250.30，P=0.000)；细胞内OPN、OCN蛋白阳性表达显著增强。TGF-β1联合BMP9处理能刺激信号通路相应的Smad 荧光素报告活性(x2=32.84, P=0.000)。
结论：在BMP9诱导间充质干细胞成骨分化中，联合应用TGF-1具有促进成骨作用，BMP9与TGF-1在成骨分化中可能存在互补效应。
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