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目的:观察环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)对破骨细胞分化过程中氧化应激相关基因的转录水平的影响。方法:取12周龄C57BL/6小鼠下肢骨髓分离骨髓巨噬细胞(bone marrow macrophages, BMMs)。通过MTS法检测不同浓度的CAG对BMMs活力的影响。通过重组谷胱甘肽S转移酶重组核因子κB受体活化因子配体蛋白(Recombinant Glutathione S-transferase-recombinant receptor activator of Factor-κB ligand protein, GST-rRANKL)联合巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor, M-CSF)诱导破骨细胞(osteoclast, OCL)形成,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase, TRAcP)染色鉴定阳性细胞(>3个核)数量以确定CAG对破骨细胞分化的影响。通过RAW264.7细胞系构建核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)-抗氧化转录元件(antioxidant response element, ARE)荧光素酶报告基因检测CAG对细胞内ARE转录活性的影响。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, qPCR)检测CAG对氧化应激相关基因的表达的影响。结果:CAG 0μmol·L-1,5μmol·L-1和10μmol·L-1各组经MTS法所测的吸光值分别为0.975±0.049,1.004±0.066,0.993±0.013,差异无统计学意义(F=0.294,P=0.756),其中5或10μmol·L-1组与0μmol·L-1组的吸光值无明显差异(P=0.6845,P=0.8525)。RANKL联合CAG 0μmol·L-1,5μmol·L-1和10μmol·L-1各组TRAcP染色阳性的破骨细胞数量(核数目>3个)分别为172.7±10.12,66.33±4.041,50±2.646,差异有统计学意义(F=317.8,P<0.000 1),其中5μmol·L-1组和10μmol·L-1组染色阳性的破骨细胞数量均显著低于0μmol·L-1组(P<0.000 1,P<0.000 1),并呈剂量效应。空白对照组,RANKL组和RANKL+10μmol·L-1 CAG组干预48小时后的ARE转录活性分别为622 748±27 270,348 114±1 407,653 747±2 878,差异有统计学意义(F=337.8,P<0.000 1),其中RANKL组的ARE转录活性低于空白对照组(P<0.000 1),而RANKL+10μmol·L-1CAG组的ARE转录活性高于RANKL组(P<0.000 1)。以空白对照组作为参照时,空白对照组、RANKL组、RANKL+10μmol·L-1CAG组的Nrf2 mRNA表达量、Nrf2与Kelch样ech相关蛋白1(kelch like ech associated protein 1,Keap1)比值、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HMOX1)mRNA表达量、过氧化氢酶(catalase,CAT)mRNA表达量的倍数关系分别为(1.015±0.376,0.568±0.062,1.436±0.085),(1.004±0.107,0.790±0.021,1.078±0.080),(1.001±0.060,0.309±0.023,0.635±0.059)、(1.004±0.107,0.790±0.021,1.078±0.080),差异均有统计学意义(F=30.04,P<0.0007;F=11.02,P=0.0098;F=8 227,P<0.000 1;F=147.5,P<0.000 1);RANKL组上述四项指标均低于空白对照组(P=0.013,P=0.027,P<0.000 1,P<0.000 1),而RANKL+10μmol·L-1CAG组上述四值均有升高(P=0.0005,P=0.0003,P=0.0004,P=0.0072)。结论:CAG能够在不影响BMMs细胞活力的情况下抑制RANKL诱导的破骨细胞形成,这可能与其能够增强ARE的转录活化水平,进而上调氧化应激相关基因Nrf2、HMOX1、CAT的表达有关。