【摘 要】
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[目的]本实验针对2015年从广东省某动物医院采集的同一个鸭源肛拭子中分离的两株携带blaNDM耐药基因的大肠杆菌的菌株特征以及耐药机制进行研究.[方法]采用PCR与测序方法对blaNDM耐药基因的亚型进行测定.采用琼脂稀释法以及PCR方法测定这两株菌对17种抗菌药物的耐药表型以及其他的30种常见的耐药基因携带情况.随后,通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)以及多位点序列分型(MLST)实验分析两株菌的
【机 构】
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华南农业大学兽医学院/广东省兽药研制与安全评价重点实验室,广州510642
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨
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[目的]本实验针对2015年从广东省某动物医院采集的同一个鸭源肛拭子中分离的两株携带blaNDM耐药基因的大肠杆菌的菌株特征以及耐药机制进行研究.[方法]采用PCR与测序方法对blaNDM耐药基因的亚型进行测定.采用琼脂稀释法以及PCR方法测定这两株菌对17种抗菌药物的耐药表型以及其他的30种常见的耐药基因携带情况.随后,通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)以及多位点序列分型(MLST)实验分析两株菌的亲缘关系.最后,采用接合转移实验,S1-PFGE,Southern杂交,质粒的复制子分型(PBRT)及PCR定位(PCR mapping)等方法研究两株菌株携带blaNDM质粒的特征.[结果]两株大肠杆菌FS13-1和FS13-2携带的blaNDM基因均为blaNDM-5.MIC测定表明这两株菌对替加环素敏感,对粘菌素表现为中介耐药,其中FS13-1对氨曲南表现为低水平耐药,而FS13-2对氨曲南和阿米卡星敏感,对其余受试的药物均表现耐药.常见的耐药基因筛查发现两株菌均携带blaCTX, blaTEM, fosA3,DHA,CMY-2,aac(6)-Ib,且FS13-1还携带rmtB和blaCMY-2.MLST测定发现FS13-1和FS13-2分别为ST156和ST648.PFGE分析进一步表明这两株菌遗传背景不同,不是克隆菌株.接合实验表明这两株菌携带的blaNDM-5均能转移到受体菌中.复制子分型以及S1-PFGE、Southern杂交证明blaNDM-5均位于～48kb的IncX3型质粒上.blaNDM-5基因侧翼序列分析表明两株菌中blaNDM-5的基因环境相同,均为ISAba125-IS5-blaNDM-5-bleMBL-trpF-dsbC-IS26.[结论]本研究首次在食品动物源中检测到blaNDM-5,并且在同一鸭源肛拭子中检测到两株携带该基因的大肠杆菌,尽管他们的遗传背景不同,但是blaNDM-5均位于～48kb的IncX3型可接合性质粒上,且基因环境相同.大肠杆菌中携带blaNDM-5基因可通过质粒以及其他可移动元件在菌株间进行散播,警示相关部门应重视并加强对携带blaNDM菌株的监测.
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